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紫外分光光度计基本原理与构造详解:从光源到检测器

更新时间:2026-01-14点击次数:57
       紫外分光光度计是一种基于物质分子对紫外光选择性吸收特性进行定量与定性分析的仪器,其核心原理可追溯至朗伯-比尔定律:当单色光通过溶液时,吸光度(A)与溶液浓度(c)、光程长度(l)及摩尔吸光系数(ε)成正比,即A=εcl。这一关系揭示了物质浓度与光吸收强度的线性关联,为定量分析奠定理论基础。
  光源系统:能量供给的核心
  仪器采用双光源设计以覆盖紫外-可见光区(200-800nm)。紫外区(180-360nm)使用氘灯,其发射光谱在短波段具有高强度与稳定性;可见光区(350-1000nm)则采用钨灯或卤钨灯,通过热辐射产生连续光谱。光源需满足高稳定性、低噪声及长寿命要求,例如氘灯寿命可达2000小时以上,确保长时间分析的可靠性。
  单色器:光谱分离的精密单元
  单色器通过色散元件(棱镜或光栅)将复合光分解为单色光。棱镜利用不同波长光的折射率差异实现分离,但存在非线性色散问题;光栅则通过衍射原理实现近似线性色散,分辨率更高(可达0.1nm)。现代仪器多采用凹面反射光栅,兼具色散与聚焦功能,显著提升光能利用率。入射/出射狭缝进一步限制杂散光,确保单色光纯度。
  吸收池:光与物质相互作用的场所
  吸收池(比色皿)材质需与检测波长匹配:石英池透光范围达185-4000nm,适用于紫外-可见光区;玻璃池仅能透过340nm以上可见光,用于常规分析。池体光程通常为1cm,特殊需求可选用0.1-10cm可调光程池。操作时需避免手指接触透光面,防止污染影响透光率。
  检测器:光信号转化的关键
  光电倍增管(PMT)是紫外分光光度计的主流检测器,其阴极材料决定响应波长范围:锑铯阴极适用于200-625nm紫外-可见区,银氧化铯阴极覆盖625-1000nm近红外区。PMT通过多级倍增将光电流放大至10^6-10^7倍,显著提升检测灵敏度(可达10^-6吸光度单位)。现代仪器亦采用光电二极管阵列(PDA),实现全波长同步检测,扫描速度较传统单点检测提升百倍。
  系统协同与误差控制
  各部件通过精密光学设计协同工作:光源稳定性需优于±0.5%/h,单色器波长重复性需达到±0.2nm,检测器线性范围需覆盖0-2A。环境因素如温度波动(建议恒温25±1℃)、湿度变化(相对湿度<65%)及尘埃污染均可能引入误差,需通过恒温箱、防尘罩及定期校准(如用重铬酸钾标准溶液)进行控制。操作时需遵循“由稀到浓”的测试顺序,减少比色皿污染导致的浓度误差。
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